Introducción
El sistema de detección Renata de Waters permite el análisis por inyección de flujo y la cuantificación de compuestos orgánicos en matrices biológicas.
Este documento describe una prueba del rendimiento analítico del sistema de detección RenataDX para el análisis de aminoácidos, carnitinas libres y acilcarnitinas en muestras de sangre seca.
Experimental
Las muestras de control de gotas de sangre seca extraídas (DBS) se analizaron con el sistema de detección RenataDX, bajo el control del software MassLynx IVD (v4.2), y los datos se procesaron utilizando IonLynx Application Manager.
Descripción de muestra
Se incubó una muestra de DBS de 3 mm de diámetro en una solución de patrón interno a base de metanol. Tras el período de incubación, las muestras se transfirieron de la placa de extracción a una placa de microtitulación limpia de 96 pocillos.
Condiciones de análisis de inyección de flujo
| Tubería del sistema: | Filtro en línea de PEEK de ~1 metro (0,005″ de diámetro interior) con válvula de postinyección (tamaño de poro de 2 μm) |
| Fase móvil A: | 80% de acetonitrilo (ac) con 0,05% (v/v) de ácido fórmico |
| Lavado 3777C 1: | 20% Metanol (ac.) |
| Lavado 3777C 2: | 80% de acetonitrilo (ac) con 0,05% (v/v) de ácido fórmico |
| Caudal: | Caudal variable de 150 μL/min a 15 μL/min, con descarga de 500 μL/min |
Condiciones de EM
| Resolución: MS1 (0,70 pies cuadrados), MS2 (0,70 pies cuadrados) | |
| Modo de adquisición: MRM | |
| Resultados y discusión: Imprecisión de la extracción y el análisis de aminoácidos y acilcarnitinas se ilustra en las Tablas 1 y 2. Se muestra la relación señal-ruido (S/N) pico a pico (PtP), como una indicación de la sensibilidad analítica del sistema.  Tabla 1. Características de rendimiento de los analitos de aminoácidos. Se realizaron experimentos de imprecisión entre lotes en cinco ocasiones (n = 25); μM en sangre completa, considerando la dilución del material de DBS en la solución de extracción; endógeno = control de DBS de un solo donante; CC 1 y 2 de origen comercial; N/D = no detectado, es decir, imprecisión ≥20 % CV ± S/N (PtP) ≤3; N/D = no aplicable. Tabla 2. Características de rendimiento de los analitos carnitina libre y acilcarnitina. Se realizaron experimentos de imprecisión entre lotes en cinco ocasiones (n = 25); μM en sangre completa, considerando la dilución del material de DBS en la solución de extracción; endógeno = DBS de un solo donante; CC 1 y 2 de origen comercial; N/S = sin suplementar; N/A = no aplicable; N/D = no detectado, es decir, imprecisión ≥20 % CV ± S/N (PtP) ≤3.Conclusión: El sistema de detección Waters RenataDX ha demostrado su capacidad para medir un subconjunto de aminoácidos, carnitinas libres y acilcarnitinas. La concentración endógena de algunos analitos se encontraba en el límite de detección del sistema RenataDX. Descargo de responsabilidad Los datos de rendimiento analítico que se presentan aquí son solo ilustrativos. Waters no recomienda ni sugiere el análisis de los analitos aquí descritos. Estos datos tienen como único objetivo demostrar el rendimiento del sistema con analitos representativos de los que se analizan habitualmente mediante análisis de inyección de flujo y espectrometría de masas en tándem. El rendimiento en un laboratorio puede variar debido a diversos factores, como los métodos de laboratorio, los materiales utilizados, la técnica intraoperador y las condiciones del sistema. Este documento no constituye una garantía de comerciabilidad ni de idoneidad para ningún fin específico, ni expresa ni implícita, ni siquiera para el análisis de los analitos incluidos en este análisis. |